洗涤在人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)检测试剂盒过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)检测试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)检测试剂盒实验要点,洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)检测试剂盒试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为*,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)检测试剂盒相关产品如下:hz-3493E 猪白介素1α(IL-1α)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3495E 猪生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3496E 猪地塞米松(Dex)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3503E 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3509E 猪氢化可的松(HYD)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3511E 猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3512E 猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3513E 猪血管生成素2(ANG-2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3514E 猪血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3515E 猪血管生成素1(ANG-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3517E 猪热休克蛋白90(HSP-90)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3518E 猪热休克蛋白70(HSP-70)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3519E 猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3520E 猪热休克蛋白20(HSP-20)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3522E 猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3526E 猪髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3528E 猪α干扰素(IFN-α)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3530E 猪乙酰胆碱(ACh)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3531E 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA kit 血清/组织/尿液