洗涤在人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)检测试剂盒过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)检测试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)检测试剂盒实验要点,洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)检测试剂盒试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)检测试剂盒相关产品如下:hz-3349E 小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3350E 小鼠吡啶交联物(PY)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3351E 小鼠骨桥素(OPN)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3352E 小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3353E 小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3354E 小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3355E 小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3356E 小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3357E 小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3361E 小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3363E 小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3364E 小鼠P物质受体(SP-R)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3365E 小鼠P物质(SP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3366E 小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3367E 小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-3369E 小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3370E 小鼠胰岛素原(PI)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3371E 小鼠抗IgE受体抗体ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3372E 小鼠抗IVIgG抗体ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3373E 小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3374E 小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3375E 小鼠p53(p53)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3376E 小鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3377E 小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3378E 小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3379E 小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3380E 小鼠组胺(HIS)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3381E 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3382E 小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3383E 小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-3384E 小鼠脂联素(ADP)ELISA kit 血清/组织/尿液