洗涤在人活化蛋白C(APC)检测试剂盒过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。人活化蛋白C(APC)检测试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
人活化蛋白C(APC)检测试剂盒实验要点,洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低人活化蛋白C(APC)检测试剂盒试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
人活化蛋白C(APC)检测试剂盒相关产品如下:hz-1457E 人多免疫球蛋白受体(poly-IgR)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1458E 人血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1459E 人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1460E 人免疫球蛋白j链(Ig-j)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1461E 人血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1462E 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1463E 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1464E 人游离蛋白S(FP-S)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1465E 人异常凝血酶原(APT)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1466E 人循环免疫复合物(CIC)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1467E 人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1468E 人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1469E 人纤溶酶原(Plg)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1470E 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1471E 人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1472E 人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1473E 人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-1475E 人溶血补体(Hc)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1476E 人T细胞受体(TCR)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1477E 人狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1478E 人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA kit 血清/组织/尿液
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hz-1481E 人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-1482E 人血栓调节蛋白(TM)ELISA kit 血清/组织/尿液
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