洗涤在人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)检测试剂盒过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)检测试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)检测试剂盒实验要点,洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)检测试剂盒试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为*,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)检测试剂盒相关产品如下:hz-2880E 大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2881E 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2882E 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2883E 大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2884E 大鼠纤连蛋白(FN)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2885E 大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2886E 大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2887E 大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2888E 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2889E 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2890E 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2891E 大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2892E 大鼠活化素A(ACV-A)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2893E 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2894E 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2895E 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2896E 大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2450E 鸡极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2451E 鸡转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2452E 鸡胰高血糖素(GC)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2453E 鸡甲状腺素(T4)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2454E 鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2455E 鸡抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2456E 鸡核因子κB(NF-κB)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2457E 鸡弓形虫循环抗原(TCA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2458E 鸡甲状旁腺激素(PTH)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2459E 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2460E 鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2461E 鸡脂多糖/内毒素(LPS)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2462E 鸡β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2463E 鸡免疫球蛋白E(IgE)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2464E 鸡免疫球蛋白A(IgA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2465E 鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2466E 鸡白介素1β(IL-1β)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2467E 鸡主要组织相容性复合体(MHC/B)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2468E 鸡热休克蛋白70(HSP-70)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2469E 鸡白痢抗体检测(PD)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2470E 鸡分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA kit 血清/组织/尿液