洗涤在人凝溶胶蛋白(GS)检测试剂盒过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。人凝溶胶蛋白(GS)检测试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
人凝溶胶蛋白(GS)检测试剂盒实验要点,洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低人凝溶胶蛋白(GS)检测试剂盒试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为*,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
人凝溶胶蛋白(GS)检测试剂盒相关产品如下:hz-0014E 人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0015E 人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0016E 人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0017E 人干扰素调节因子(IRF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0018E 人淋巴毒素β(LTB)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0019E 人淋巴毒素α(LTA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0020E 人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0021E 人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0022E 人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0023E 人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0024E 人β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0025E 人可溶性CD38(sCD38)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0026E 人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0027E 人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0028E 人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0029E 人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0030E 人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0031E 人白三烯D4(LTD4)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0032E 人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0033E 人红细胞刺激因子(ESF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0034E 人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0035E 人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0036E 人巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0037E 人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0038E 人B细胞生长因子(BCGF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0039E 人B细胞分化因子(BCDF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0040E 人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0041E 人可溶性粘附分子(Sam)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0042E 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0043E 人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0044E 人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0045E 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0046E 人多效生长因子(PTN)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0047E 人可溶性CD28(sCD28)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0048E 人淋巴细胞因子ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0049E 人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0050E 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-0051E 人神经保护因子(CVNPF)ELISA kit 血清/组织/尿液