洗涤在人热休克蛋白70(HSP-70)检测试剂盒过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。人热休克蛋白70(HSP-70)检测试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
人热休克蛋白70(HSP-70)检测试剂盒实验要点,洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低人热休克蛋白70(HSP-70)检测试剂盒试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
人热休克蛋白70(HSP-70)检测试剂盒相关产品如下:hz-2519E 鸡B因子(BF)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2520E 鸡5核苷酸酶(5-NT)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2521E 鸡层连蛋白/板层素(LN)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2522E 鸡17-酮类固醇(17-KS)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2523E 鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2524E 鸡神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2525E 鸡白介素17(IL-17)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2526E 鸡1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2527E 鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2528E 禽脑脊髓炎(AE)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2529E 鸭白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2530E 鸭白介素4(IL-4)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2531E 鸭白介素2(IL-2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2532E 鸭子碳酸酐酶(CA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2533E 鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2534E 鸭环磷酸腺苷(cAMP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2535E 鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2536E 鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2537E 鸭病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2538E 鸭白介素6(IL-6)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2539E 鸭白介素1(IL-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2540E 鸭γ干扰素(IFN-γ)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2541E 绵羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2542E 绵羊白介素2(IL-2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2543E 绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2544E 绵羊白介素6(IL-6)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2545E 绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2546E 绵羊白介素1(IL-1)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2547E 绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2548E 绵羊白介素2受体(IL-2R)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2549E 猴白介素4(IL-4)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2550E 猴白介素2(IL-2)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2551E 猴Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2552E 猴Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2553E 猴透明质酸(HA)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2554E 猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA kit 血清/组织/尿液
hz-2555E 猴B病毒(BV)ELISA kit 血清/组织/尿液