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较早公告: ELISA试剂盒积累了大量的经验ELISA试剂盒常见问题解析:1、试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。2、加样中可能遇到的问题:3、洗板时容易造成误差:4、显色问题:使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。5、终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,产生气泡,造成假阳性结果,所以在倒终止剂的时候要缓慢倒。6、读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净。
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大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒

大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒

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Rat neutrophil elastase (NE) ELISA Kit
大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒用于大鼠血清,血浆及相关液体样本中大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)含量。价格公道,现货供应。

大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒的详细资料:



大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒实验步骤 

一、预试验(一)抗体包被的酶标板的制备


1.  以碳酸盐缓冲液将抗体稀释成适当浓度(参考:5ug/ml),加入酶标板(50ul/孔),以胶带封口,于4℃过液。

2.  弃抗体液,以双蒸水冲洗3次,自然干燥后以胶带封口。此为由已知抗体包被的酶标板,备用。

(二)底物浓度的摸索在底物缓冲液中加入不同量的底物(参考:5mg/10ml),加入酶标板中(50ul/孔),以胶带封口,37℃避光保存2h,在没有明显变色的条件下选择尽可能大的底物浓度。

(三)酶标抗原浓度的摸索选择明确为阴性的标本,加至已包被抗体的酶标板中(50ul/ 孔);用稀释液稀释酶标抗原至适当倍数(参考:40~4000倍),同时加入酶标板中(50ul/ 孔),混合后封口后于37℃作用30min。大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒以洗液连续冲洗5次,然后于吸水纸上拍干,加入已摸索好的底物封口后于37℃作用30min,在保持有明显变色的条件下选择尽可能小的酶标抗原浓度。

、正式试验

1.  以稀释液将待检标本做适当稀释(预试中确定)加入包被有已知抗原的酶标板中(50ul/孔),加封口胶带于37℃作用30min。

2.  弃反应液,以冲洗液连续洗板5次并于吸水纸上拍干。

3.  加入酶标抗体(浓度在预试中确定)。加封口胶带后于37℃作用30min。

4.  重复第2步。

5.  加底物(浓度在预试中确定),加封口胶带后于室温下避光作用5-60 min,其间不时观察,显色满意后加终止液50ul/孔。

6.  于酶标仪测定OD值,OPD用492nm测定,TMB用450nm测定。窗体顶端

大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒结果演示

 

大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒结果判断定性测定 

  定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答,分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的zui高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。

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