优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。
犬免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒技术参考实验-标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液、分泌物和排泄物）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。
犬免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒技术参考实验-标本的采取和保存
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELISA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中，洗涤是zui主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。
犬免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒技术参考实验要点，洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下：
（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗涤3-4次（或按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
（2）流水冲洗式 流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为*，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。
犬免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒技术参考相关产品展示：hz-2629E 人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2630E 人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2631E 人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2632E 人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2633E 人血管紧张肽酶A(ATA)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2634E 人胰淀粉酶(PAMY)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2635E 人α烯醇化酶(αENOL)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2636E 人胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2637E 人胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2638E 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2639E 人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2640E 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2641E 人酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2642E 人多巴胺脱羧酶(DDC)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2643E 人非神经元性烯醇化酶(NNE)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2644E 人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2645E 人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2646E 人异柠檬酸脱氢酶(ICD)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2647E 人胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2648E 人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2649E 人透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2650E 人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2651E 人酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2652E 人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2653E 人磷酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2654E 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2655E 人链激酶(SK)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2656E 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2657E 人过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2658E 人芳基硫酸酯酶A(ASA)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2659E 人对氧磷酶(PON)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2660E 人丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2661E 人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2662E 人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2663E 人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2664E 人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2665E 人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2666E 人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2667E 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2668E 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
hz-2669E 人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒 血清/组织/尿液
|
